核酸提取在与分子生物学有关行业里来说是基础的操作,一般提取的核酸包括常规DNA、RNA提取外还包括:ctDNA、cfDNA、微小RNA(miRNA)等特殊靶样本的提取。DNA、RNA大家都听说的比较多,对ctDNA、cfDNA却不怎么知道,医疗器械厂家小编就给大家介绍一下什么是ctDNA、cfDNA,要怎么提取这些核酸吗?
ctDNA也就是循环肿瘤细胞DNA,是指在血液中可能存在少部分肿瘤细胞坏死分泌的DNA片段,我们细胞内的DNA并不是都呆在我们的细胞核内,这些DNA也会游离到血液中来,这些在血液中的DNA就被我们称之为cfDNA,但是正常细胞和肿瘤细胞是不一样的,我们把来自于肿瘤的cf DNA用另一个名次替代,那就是ctDNA。
miRNA是长度在21-23个核苷酸之间的单链RNA片段,调节基因的表达。miRNA由基因编码,从DNA转录而来,在细胞分化,生物发育及疾病发生发展过程中发挥巨大作用。
从样品中提取核酸的方法有很多种,其中,磁珠分离法是目前应用广广泛、运用于自动化处理系统中成熟的一种方法。由于ctDNA、cfDNA在外周血中含量极低,因此对于提取、检测技术有很高的要求。目前ctDNA、cfDNA的检测主要包括分离富集和检测。富集方法包括梯度密度离心法、过滤法和http://www.pl999.com/class.php?anclss=2&nclass=415磁珠法核酸提取仪(常用),检测方法包括免疫学相关技术、反转录聚合酶连锁反应技术、酶联免疫斑点技术以及芯片技术。提取miRNA的主要方法有:差速离心法、超滤法和免疫亲和层析法,各有优缺点,采用多种方法联合应用分离提取miRNA,可提高产物纯度,稳定生物活性。
核酸提取,作为核酸检测基本步骤的首要环节,在临床分子诊断中具有极其重要的地位,核酸的种类众多,不同的核酸适用于不同的提取方法,能否获得高质量的核酸是后续检测的关键,随着医学研究的不断发展,临床分子诊断衍生出不同应用场景和检测需求,对于核酸提取的要求也不尽相同,推动了核酸提取技术的进一步发展。