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    RPMI-1640 培养基

    放大字体  缩小字体 发布日期:2025-10-29 16:45:17    浏览次数:61
    导读

      RPMI-1640培养基不仅是科研工作者手中的得力助手,更是推动生命科学研究不断前进的重要力量。在未来的日子里,随着生命科学

      RPMI-1640培养基不仅是科研工作者手中的得力助手,更是推动生命科学研究不断前进的重要力量。在未来的日子里,随着生命科学领域的不断发展和创新,将继续发挥其重要作用,为人类健康和科技进步贡献更多的力量。
    RPMI-1640培养基在细胞培养过程中的使用:
    1.细胞复苏后的换液
    -当从冻存状态复苏细胞后,细胞接种到含有适量RPMI-1640培养基的培养瓶或培养皿中。一般接种密度根据细胞种类和实验目的有所不同,例如对于贴壁细胞,每平方厘米可能需要接种数千个细胞。
    -细胞接种后,将其放入37℃、CO2培养箱中培养。在细胞复苏后的24小时内,需要观察细胞的贴壁情况和状态。当细胞贴壁后(一般贴壁细胞在接种后几个小时内开始贴壁),可以更换新鲜的RPMI-1640培养基,以去除复苏过程中可能产生的一些对细胞有害的物质,如冻存保护剂二(DMSO)。
    2.常规换液
    -根据细胞的生长速度和代谢情况确定换液频率。一般来说,对于生长较快的细胞,可能需要每2-3天换液一次;对于生长较慢的细胞,可以每3-4天换液一次。
    -换液时,小心地吸出旧的培养基,注意不要吸到细胞。然后加入适量的新鲜RPMI-1640培养基,一般以覆盖细胞单层为宜。例如,对于一个T-25培养瓶中的细胞,每次可以加入3-5ml的培养基。
    3.传代培养
    -当细胞生长达到一定的汇合度(例如,贴壁细胞汇合度达到80-90)时,需要进行传代。首先弃去旧的培养基,用适量的盐缓冲液(PBS)清洗细胞,以去除残留的培养基和细胞代谢产物。
    -加入适量的胰蛋白酶-EDTA消化液(一般根据培养瓶或培养皿的底面积加入适量,如T-25培养瓶可以加入0.5-1ml),将细胞消化下来。消化时间根据细胞种类和胰蛋白酶的活性而定,一般在室温下消化几分钟,直到细胞变圆、开始脱落。
    -加入含血清(如胎牛血清,终浓度一般为10左右)的RPMI-1640培养基终止消化,然后将细胞悬液转移到离心管中,以适当的转速(如1000rpm,离心5分钟)离心收集细胞。
    -弃去上清液,用适量的RPMI-1640培养基重悬细胞,然后按照合适的比例(如1:2或1:3等)将细胞接种到新的培养容器中,继续培养。
    RPMI-1640 培养基
    http://www.wissen-bio.com/wbscell-Products-37719408/
    https://www.chem17.com/st251749/product_37719408.html

     
    (文/小编)
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